2020, 36(1): 56-62.
摘要:
目的 通过阿尔茨海默病斑马鱼模型，探讨补肾益智方的作用机制。方法 选取6月龄斑马鱼，随机分成5组，分为空白对照组（n=12）、模型组（n=10）、阳性药组（n=10）、补肾益智方高剂量组（n=11）和低剂量组（n=12）。除空白对照组，其余各组均用AlCl3·6H2O配制成浓度为100 μg/L的溶液持续浸泡斑马鱼30 d，每天更换一半的染毒培养液。染毒结束后利用T迷宫实验剔除染毒失败的斑马鱼。造模结束后，分别给予阳性药组多奈哌齐20 μg/mL，高、低剂量组补肾益智方30、10 μg/mL浸泡14 d。给药结束后，通过T迷宫实验检测斑马鱼学习记忆能力；免疫组化染色观察神经元变化；qPCR检测相关基因的表达；Western blot检测相关蛋白的表达。结果 ①在T迷宫测试第4天，模型组潜伏时间为（198.00±45.78）s，补肾益智方低剂量组为（12.75±2.29）s，补肾益智方高剂量组为（7.27±0.90）s，补肾益智方治疗组斑马鱼的潜伏时间明显低于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；②补肾益智方治疗组斑马鱼的端脑神经元数量较模型组明显增多、排列变整齐，星型胶质细胞增多；③补肾益智方组斑马鱼脑ACHE活力显著降低（P<0.01）、ChAT活力显著增加（P<0.05）；④补肾益智方治疗组斑马鱼脑组织中appb、bace1表达显著降低（P<0.01），sod、cat、nrf2基因表达显著增加（P<0.01），keap1基因表达显著降低（P<0.01）；⑤补肾益智方治疗组斑马鱼脑组织蛋白表达情况与qPCR结果一致，APP、BACE1表达显著降低（P<0.01），Nrf2表达显著增加（P<0.01），Keap1表达显著降低（P<0.01）。结论 补肾益智方能有效改善AD斑马鱼的学习记忆能力，减少Aβ生成，减轻氧化应激。
