摘要:
目的 探讨易层敷贴对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜纤维化TGF-β1、α-SMA、COL1A1表达的影响以及对PI3K/AKT/HIF-1α信号通路的调控作用。 方法 将30只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组和易层组, 膝关节腔注射200 ng转化生长因子-β1重组蛋白(TGF-β1)建立膝关节滑膜纤维化动物模型, 2 d 1次, 持续3次, 造模14 d后给予易层敷贴外用治疗28 d后取滑膜组织。HE和Masson染色观察滑膜病理变化; 免疫组化检测滑膜p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1的表达水平。提取雄性SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(FLSs), 以10 ng·mL-1 TGF-β1诱导24 h建立KOA滑膜纤维化细胞模型, 易层冻干粉干预24 h, Western blot检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1的蛋白表达, qPCR检测HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达。 结果 与空白组相比, 模型组HE染色滑膜炎加重(P < 0.01), Masson染色滑膜纤维化占比显著增加(P < 0.01), 免疫组化中p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1表达均增加(P < 0.01);滑膜细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1蛋白表达均升高(P < 0.05, P < 0.01), HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达均上升(P < 0.01)。与模型组相比, 易层组滑膜炎和滑膜纤维化状况改善, p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1的表达均减少(P < 0.05, P < 0.01);滑膜细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1蛋白表达均降低(P < 0.05), HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达均下调(P < 0.05, P < 0.01)。 结论 易层敷贴通过调控PI3K/AKT/HIF-1α信号通路, 降低TGF-β1、α-SMA、COL1A1的表达, 有效改善TGF-β1诱导的KOA大鼠滑膜纤维化。
