摘要:
目的 建立大鼠组织中黄柏碱(Phellodendrine, PHE)及其葡萄糖醛酸结合物黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(Phellodendrine-11-O-β-D-glucuronide, M1), 黄柏碱-2, 11-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(Phellodendrine-2, 11-di-O-β-D-glucuronide, M2)的含量测定方法, 考察PHE、M1和M2在各组织的分布特征。 方法 正常SD大鼠以40 mg·kg-1的剂量灌胃黄柏碱水溶液, 于0.117、0.17、0.5、1、2、3、4 h处死, 剪取心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、胰腺和小肠。组织匀浆样品采用甲醇沉淀蛋白方法处理, 以乌头碱为内标, ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(150 mm×2.1 mm, 3.5 μm)为色谱柱, 0.1%甲酸水-甲醇为流动相梯度洗脱, 流速0.3 mL·min-1, 柱温35 ℃, 在电喷雾离子化和正离子多离子反应模式下, 运用API4000+型三重四级杆质谱联用仪进行测定。 结果 PHE、M1和M2分别于1~800、1~1 000、5~1 000 ng·mL-1浓度范围内的线性关系良好, 3种成分的日内日间精密度均≤11.07%, 准确度为(91.58±1.84)%~(110.67±5.20)%。PHE、M1和M2在组织中均有分布, PHE表现为小肠>肝>肾>肺>胰腺>肌肉>脾>心>脑; M1、M2为小肠>肾>肝>心>肺>胰腺>肌肉>脾>脑。 结论 所建立的方法特异性强, 准确度高, 稳定性好, 适用于PHE、M1、M2的组织分布研究。PHE、M1、M2在大鼠体内分布广泛, 主要分布在小肠, 肾脏和肝脏。