摘要:
目的 研究菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征(Tourette syndrome, TS)模型大鼠突触体中SNARE蛋白复合体的调控作用, 揭示菖蒲郁金汤治疗TS的药效机制。方法 选择3周龄SD大鼠240只, 依据随机数字表将SD大鼠分为空白组(60只)和造模组(180只), 采用3, 3'-亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法制备TS动物模型。造模成功后, 再次随机将造模组大鼠分为模型组、硫必利组及菖蒲郁金汤组,每组60只。从造模完成后次日(即d0)开始灌胃给药, 空白组与模型组给予生理盐水, 其余各组给予相应药物, 每日1次, 连续给药4周。各组大鼠分别于第0、7、14、21、28天(即d0,d7,d14,d21,d28), 随机抽取12只大鼠, 麻醉后取纹状体, 采用Percoll密度梯度离心法制备纹状体中的突触体, 并在透射电镜下进行形态学鉴定。ELISA法检测纹状体多巴胺(Dopamine, DA)含量,qPCR和Western blot法检测突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a和VAMP-2 mRNA及蛋白的表达, 免疫组织化学法检测纹状体上述指标的表达。结果 与空白组相比, 模型组各观察点纹状体中DA含量降低(P < 0.01), 突触体/纹状体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量显著降低(P < 0.05, P < 0.01);与模型组相比较, 硫必利组及菖蒲郁金汤组在干预期间的各观察点(d7,d14,d21,d28)纹状体中DA含量以及突触体/纹状体内SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量呈逐渐升高趋势。在治疗结束后(d28), 菖蒲郁金汤组突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA, Syntaxin-1a蛋白及纹状体中SNAP-25、VAMP-2蛋白的表达高于硫必利组(P < 0.05, P < 0.01)。结论 菖蒲郁金汤通过调控SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2的表达促进DA的释放, 进而发挥其抗抽动的作用。